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紫外分光光度計測BSA濃度曲線時注意事項
發布日期：2017-03-21 瀏覽次數：6400
BSA即為牛血清白蛋白，在生化實驗中有廣泛的應用。BSA濃度可根據紫外分光光度計由曲線測得，到底是怎么一回事呢？
紫外分光光度計測量蛋白濃度常可用經典公式：
蛋白的濃度（mg/ml）=1.4280-0.74A260；
也可同時讀取一系列倍比稀釋的已知蛋白含量的標準液的光密度值，做出標準曲線，后換算出濃度。
紫外分光光度計測試需注意的是：
1.用于儀器調零的液體與待測樣品一致，標準蛋白也要使用同樣的溶液；
2.光密度值應該在0.1-0.8之間；
3.要求蛋白質溶液*透明；
4.對含量很低的蛋白質溶液可使用215/225nm的波長測定；
5.使用蛋白質濃度范圍為0.1-1.0mg/ml。
配制濃度約為10mg/ml的BSA溶液，然后按一定倍數稀釋，至低濃度為0.017mg/ml，用紫外分光光度計測試這一系列的BSA溶液的吸光度，做出標準曲線。根據測量結果而知，用紫外分光光度計測試牛血清白蛋白（BSA）的濃度，濃度太高曲線將逐漸平緩，而在0.02-2.0mg/ml濃度之間，基本能呈現出較好的線性。
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